用于辣椒粉中苏丹红检测的分子印迹固相萃取方法 （ 分子印迹专用柱)

实验部分

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测辣椒粉中苏丹红的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物;

苏丹红I(CAS:842-07-9)、苏丹红II(CAS:3118-97-6)、苏丹红III(CAS:85-86-9)、苏丹红IV(CAS:85-83-6)

三、适用范围

本方法适用于辣椒粉中苏丹红检测的HPLC检测及确证。

四、实验材料

苏丹红分子印迹专用柱。

五、实验方法

1、样品提取

准确称取辣椒粉0.5 g于15 mL离心管中，加入5 mL正己烷，涡旋混合1 min，超声5 min，3000 r/min离心5min，取上清液；上述步骤重复提取4次，合并所有上清液，于40 ℃下氮吹浓缩至约4 mL，待净化。

2、SPE净化

(1)活化：苏丹红固相萃取柱使用前用5 mL正己烷活化。

(2)上样和洗脱：往固相萃取柱中加入待净化液；再加入5 mL正己烷淋洗，弃去流出液，再加5 mL乙酸乙酯进行洗脱，收洗脱液。

(3)重新溶解：洗脱液40℃氮吹近干，1 mL乙腈定容，涡旋1 min，经滤膜过滤供HPLC测试。

3、HPLC条件

设备：Waters Alliance 2695

色谱柱：CommaSep® ODS  (4.6 mm×150 mm, 5 μm)

检测器：Waters 2487 紫外检测器

波长：478 nm

梯度洗脱：A：乙腈  B：0.1 %甲酸水溶液