酸奶中有机酸检测的固相萃取方法-SAX固相萃取柱

酸奶是以牛奶为原料，经发酵之后的一种牛奶制品。有机酸是酸乳中的重要因素，具有抑菌、抗病毒等作用。有机酸不仅是酸乳发酵的重要指标，也是酸乳的主要风味和营养物质之一和天然防腐剂，其含量高低于酸乳的品质有密切关系。

《GB5009.157-2016食品中有机酸的测定》规定了食品中酒石酸、乳酸、柠檬酸等七种有机酸的检测方法。有机酸是目前食品领域内采用的比较普遍的酸味剂，可以提高食品的风味，食品中一部分的有机酸是食品中固有的或者是工艺中形成的，但是仍然有一部分有机酸是人为添加的，因此检测食品中的有机酸的含量是很有必要的。

根据《GB5009.157-2016食品中有机酸的测定》，利用SAX固相萃取柱作为酸奶中有机酸检测的样品前处理方法，HPLC法为检测手段，开发出酸奶中有机酸的测试方法。

样品前处理：

准确移取酸奶5.0 g于50 mL离心管中加入水至50 mL涡旋1 min分散均匀。4500 r / min离心10 min。取上清液10 mL，备用。

SPE柱净化：

1.活化：SAX固相萃取柱使用前用6 mL甲醇、6 mL 水活化；
2.上样：往固相萃取柱中加入提取备用液5 mL，弃去流出液；
3.淋洗：在SPE柱上加入3 mL水淋洗，弃去淋洗液；
4.洗脱：用2mL 6%盐酸水溶液洗脱，收集洗脱液（整个上样淋洗洗脱过程中流速保持  <1 mL/min）；
5.洗脱液定容至2 mL，0.22 μm滤膜过滤，滤液上机测试。
HPLC条件：

设备：Waters Alliance 2695
色谱柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
检测器 ：Waters 2487 紫外检测器
流动相： A：甲醇   B：0.025 mol/L磷酸二氢钾（PH：2.5）
等度洗脱 ： A： B=5：95
流速：1.0 mL/min
检测波长：214 nm
进样体积:20 μL