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酸奶中有机酸检测的固相萃取方法-SAX固相萃取柱

酸奶是以牛奶为原料,经发酵之后的一种牛奶制品。有机酸是酸乳中的重要因素,具有抑菌、抗病毒等作用。有机酸不仅是酸乳发酵的重要指标,也是酸乳的主要风味和营养物质之一和天然防腐剂,其含量高低于酸乳的品质有密切关系。
《GB5009.157-2016食品中有机酸的测定》规定了食品中酒石酸、乳酸、柠檬酸等七种有机酸的检测方法。有机酸是目前食品领域内采用的比较普遍的酸味剂,可以提高食品的风味,食品中一部分的有机酸是食品中固有的或者是工艺中形成的,但是仍然有一部分有机酸是人为添加的,因此检测食品中的有机酸的含量是很有必要的。
根据《GB5009.157-2016食品中有机酸的测定》,利用SAX固相萃取柱作为酸奶中有机酸检测的样品前处理方法,HPLC法为检测手段,开发出酸奶中有机酸的测试方法。
样品前处理:
准确移取酸奶5.0 g于50 mL离心管中加入水至50 mL涡旋1 min分散均匀。4500 r / min离心10 min。取上清液10 mL,备用。
SPE柱净化:
1.活化:SAX固相萃取柱使用前用6 mL甲醇、6 mL 水活化;
2.上样:往固相萃取柱中加入提取备用液5 mL,弃去流出液;
3.淋洗:在SPE柱上加入3 mL水淋洗,弃去淋洗液;
4.洗脱:用2mL 6%盐酸水溶液洗脱,收集洗脱液(整个上样淋洗洗脱过程中流速保持 <1 mL/min);
5.洗脱液定容至2 mL,0.22 μm滤膜过滤,滤液上机测试。
HPLC条件:
设备:Waters Alliance 2695
色谱柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
检测器 :Waters 2487 紫外检测器
流动相: A:甲醇 B:0.025 mol/L磷酸二氢钾(PH:2.5)
等度洗脱 : A: B=5:95
流速:1.0 mL/min
检测波长:214 nm
进样体积:20 μL