草甘膦专用柱

草甘膦，又称农达，是一种广谱灭生性除草剂，广泛应用于茶园、果园、玉米田间等农业生产中。随着草甘膦的广泛使用，其在茶叶、水果、玉米等植物源食品中残留量的检测越来越受到国内外的关注。草甘膦（GLY）及其代谢物氨甲基膦酸（AMPA）均为小分子化合物，具有极性强、易溶于水、难溶于各种有机溶剂等特性，这给常规检测带来了极大的困难和挑战。使用草甘膦专用柱对茶叶中的草甘膦及其代谢物进行处理，使用UPLC-MS/MS测定，当草甘膦及其代谢物加标浓度为80 μg/kg，其回收率在70-100 %，RSD在5 %以内，符合测定标准。

 

一、样品提取

准确称取经粉碎的茶叶样品1.0 g(精确至0.001g)于50mL离心管中，加100 μL 浓度为10 mg/L的1,2-C13N15草甘膦同位素内标溶液，加入10ml水，涡旋混合20 min，超声振荡10 min，以4000 r/min离心8 min。

二、样品净化

移取5 mL上清液至15 ml离心管中，加5 ml二氯甲烷，涡旋5min，以4000 r/min离心4 min，取上清液2.5 mL过草甘膦专用柱.草甘膦专用柱使用前应依次用3 mL甲醇，3 mL水活化），弃去前端几滴滤液，收集后续滤液。

三、衍生

取上述滤液1mL衍生，依次加入1.0 mL 50g/L硼酸钠溶液，0.5 mL 10 g/L FMOC-Cl，涡旋混合2 min，40 ℃水浴衍生1 h，涡旋1 min，再以8000 r/min离心3 min，上清液过0.22 μm滤膜，上机检测。

四、仪器条件（Thermo Fisher TQS Endura）

液相部分：

色谱柱： Commasil® CS211003C18 (2.1 mm×100 mm，3μm)

流动相：A：乙腈（0.1 %甲酸）  B：5 mmol/L乙酸铵

流速：0.4 mL/min   柱温：30 ℃   进样量：5 μL

洗脱程序：

质谱条件：

离子源：HESI           电喷雾电压：3500 V            鞘气压力：30 arb  

辅气压力：5 arb          离子传输管：250 ℃            辅气温度：350 ℃

表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）

五、实验结果

表3  茶叶中草甘膦及其代谢物加标回收实验结果